農牧前沿原創報道，

　　現場10分鐘即出檢測結果，行業急需的非瘟檢測產品面世。

　　文/圖 農牧前沿 朱敬強

　　非洲豬瘟肆虐中國一年有余，時至今日依然難以凈化。調查表明，很多豬場在遭受非瘟打擊后，仍然有部分豬只存活了下來，成為所謂的非瘟耐過豬，但這并非喜訊，耐過豬的出現意味著非瘟病毒會長期保留于豬群中，一旦豬群免疫下降，可能會出現新的排毒與爆發。而更大風險是耐過豬的病毒血癥輕微，導致常規的分子生物學核酸檢測難以對其排查。在這樣的背景下，抗體檢測的必要性日益顯現。

　　據農牧前沿了解，臺灣凌越生醫股份有限公司已成功研發非洲豬瘟病毒抗體快速診斷試劑，該產品已通過了世界動物衛生組織OIE在英國、西班牙的非洲豬瘟參考實驗室評估，并推向了菲律賓、越南等國家，正于大陸市場推廣。為此，農牧前沿拜訪臺灣凌越中國大陸戰略合作伙伴廣州中農大生物科技有限公司，在與運營總監劉湘川、技術服務總監馬磊博士、市場部經理白楊的交流中了解臺灣凌越以及抗體檢測產品的詳細信息。

　　用極致便捷帶來快速準確的非瘟診斷

　　農牧前沿：可否簡單介紹一下臺灣凌越？

　　劉湘川：臺灣凌越全稱是凌越生醫股份有限公司（以下簡稱“凌越”），于1993年在工業技術研究院育成中心成立，主要以“免疫螢光試劑”為平臺，提供生物免疫系統檢測與支持性輔助療程相關產品的研發，并致力于人與動物過敏反應引發的相關疾病管理與治療觀念推廣。1997年臺灣爆發口蹄疫，凌越用將近8年時間研發出四個針對口蹄疫的診斷試劑，是2018年底臺灣口蹄疫正式凈化前的主要診斷試劑。因為與世界動物衛生組織OIE參考實驗室聯系密切，早在2017年就開始非洲豬瘟相關研究，是國內較早開展非洲豬瘟抗原抗體檢測試劑研究的企業。因發展需求，凌越與中農大合作在大陸成立分公司，除擴大產能開拓大陸市場外，也將進行分子生物學診斷試劑和配套設備的研發，不僅僅是非洲豬瘟，還將覆蓋畜禽各項疾病的檢測。

　　農牧前沿：相較市面的其他檢測產品，該產品的主要優勢是什么？

　　劉湘川：本產品優勢可簡單概括為便捷、快速、準確。首先，凌越非洲豬瘟病毒抗體快速診斷試劑板（以下簡稱“檢測板”或“本產品”）無需冷藏，常溫下即可保存，市面常見的PCR檢測試劑則需要冷凍保存；第二，本產品為單樣檢測，可避免交叉污染；再者，本產品使用便捷，養戶只需在豬耳邊、尾尖或者后腿內測用針刺一下靜脈血管，用配套吸管采集一滴血液，10分鐘即可在現場得到診斷結果，無需專業人員實驗室操作，無需其他儀器設備；此外，檢測板使用后可直接焚燒，以避免成為傳染源；生豬感染非洲豬瘟的1-7天為感染早期，其體內抗體濃度不足以檢測，本產品最早可以在感染后8天檢測出準確結果；在產品研發完成后，我們將產品送往了OIE的英國、西班牙非洲豬瘟參考實驗室進行評價，凌越檢測板與非洲豬瘟參考實驗室采用的酵素結合免疫吸附分析法（ELISA）檢測結果100%符合。

　　排查耐過豬，抗體檢測必不可少

　　農牧前沿：該產品的市場定位是怎樣的？主要目標客戶是哪些？

　　劉湘川：第一類目標客戶是散養戶，普通的小規模散養戶不具備通過實驗室做出早期判斷的條件，但是如果常備本產品，一經發現某頭豬只異樣，即可在現場快速診斷是否為非洲豬瘟感染，及時做出后續處理。第二類目標客戶是需要引進種豬、后備豬、育肥豬的較大型養豬場，非洲豬瘟在中國傳播一年有余，使得豬群中出現很多無病毒血癥但臟器中仍藏有活病毒的耐過豬，該類豬通過常規的PCR核酸檢測（抗原檢測）難以檢測到病原，當環境變化或其他因素引起豬只發生應激反應抵抗力下降，耐過豬仍可能再次出現病毒血癥并向外排毒，因此，從場外引進豬源前必須要同時進行抗原檢測和抗體檢測，排查耐過豬。第三類目標客戶是接種疫苗的養豬場，將來疫苗研發成功，該產品可用于疫苗作用效果的評價和豬場免疫程序的制定（補苗周期），后續開發的產品甚至可以鑒別疫苗與野毒。

　　此外，該產品也可以應用于豬場非瘟防控的檢測。非瘟防控分三個層面，第一層是豬場外環境的阻隔，包括道路、運輸車輛、水、空氣等，該層面應用PCR進行檢測；第二層是豬場內部環境的洗消，同樣是應用PCR進行檢測；第三層是生豬的非瘟監測。非瘟監測分兩階段，第一階段是在生豬無癥狀時采集鼻腔粘液或唾液進行PCR檢測，可以在早期（豬瘟最先接觸的是口和鼻腔）排查出感染病毒的生豬，但僅可反映該時間點是否存在病毒；第二階段是應用本產品進行抗體檢測，檢測結果（強陽性、弱陽性，陰性）將成為“拔牙”或其他處理方式的指導依據。

　　農牧前沿：引種前若通過該產品排查耐過豬大約需要多大成本？

　　劉湘川：引種建議逐頭檢測非瘟抗體，以引種100頭為例大約需要7千元。

　　20年技術積累，得以達到95%的純度

　　農牧前沿：該產品的核心競爭力是什么？如何應對市場競爭？

　　劉湘川：就目前而言，市面上銷售非洲豬瘟病毒抗體快速診斷試劑板的企業除凌越外只有一家外企，但其產品與本產品仍有一定差異性，國內尚未有企業將快檢卡做到凌越的水平。今年，農業部先后公布了兩批非洲豬瘟快速檢測試劑名單，但所公布產品均為PCR檢測試劑盒，需要實驗室和專業人員不說，檢測時間也長達1-2小時。所以當有其他企業做出了抗體快檢卡時，我們或許已經做出了抗原快檢卡甚至做出了手持判讀器，總之會領先其他企業一步。

　　農牧前沿：該產品的研發難在哪里？為什么包括凌越在內僅有兩家企業可做出抗體檢測板？

　　劉湘川：評價快速檢測試劑效果有三項指標，即靈敏度、特異性、重復性。只有找到合適的蛋白，并有足夠高的純度，才能滿足三項指標進而保證其準確性。經過大量實驗，我們發現非洲豬瘟病毒的P30蛋白相較其他快速檢測試劑常用的P72蛋白表達更早并且有更高的表達量，但是純化更為困難。而作為一家從事過敏原檢測試劑研發的企業，臺灣凌越有長達20年的精確純化技術積累，最終使試劑純度達95%以上。

　　農牧前沿：抗原快速檢測板研發難度更大嗎？

　　劉湘川：抗原快速檢測板的技術難度的確更大，目前市面的抗原檢測敏感性很差，遠達不到OIE規定的80%的要求。

　　與云端結合，快檢卡或將變革企業的疫病監控系統

　　農牧前沿：該產品是什么時候上市的？應用效果反饋如何？

　　劉湘川：今年3月份該產品研發成型，4-6月份我們將產品送往了OIE的英國、西班牙非洲豬瘟參考實驗室進行評價，7月份才正式上市，至今為止該產品仍主要在華中農業大學、南京農業大學、華南農業大學以及有條件的企業實驗室進行準確度測試，效果反饋良好，其結果甚至可能成為實驗室用來復核非瘟抗體ELISA檢測結果的一個參照標準。

　　農牧前沿：目前該產品是如何在市場推廣的？

　　劉湘川：經過我們的前期調研，我們發現在長江以北，中小養殖戶仍是豬肉供應的主體，所以我們將以省為單位尋找與散戶連接的銷售渠道，向下聯絡上百個網點推廣銷售，讓需要的養戶在第一時間看到并得以購買。而長江以南養殖業規模化程度較高，我們需要推廣的“機遇”，如政府加強生豬流通監查，企業復養前引進豬源，因為較為規范的大型養殖企業的需求如果是在1-8天內（感染早期）做出檢測，則不適合用本產品，但可以將本產品作為非瘟感染診斷工具，其結果可作為后續處理的指導依據。

　　除此之外，我們正規劃推廣快檢卡產品主導的疫病監控系統。為避免成為病原傳播源，大企業的常規豬群疫病監控系統下養殖場通常不設實驗室，所有養殖場的檢測樣本送往中心實驗室統一檢測并管理數據。快檢卡將在未來打破這種體系，快檢卡在臨床單樣檢測，用后可直接焚燒銷毀，不會成為傳染源，養殖場將快檢卡插入本公司的檢測儀器，即可通過云端將數據傳至中心實驗室統一管理。我們認為該系統可能會帶動集團企業疫病監控的變革。